铁岭市实时荧光定量PCR仪研发

全球，虽然只有少数的芯片可用于临床诊断，但国内基因芯片技术已经处于世界领 跑的地位。基因芯片技术将是荧光定量PCR 检测技术具挑战的潜在对手，主要是：荧光定量PCR 技术一次只能检测一个或几个目标基因，而基因芯片技术可以实现对大量目标基因的同时检测。随着人类基因组计划的进展，基因芯片在国内外已成为研发热点。若基因芯片技术迅速成熟并大规模产业化，将对荧光定量PCR 检测产生较大的冲击。不过，基因芯片的大规模临床应用还存在尚未克服的技术缺陷，主要是由于芯片诊断特异性和灵敏度低、芯片诊断成本高昂和芯片诊断配套仪器价格昂贵等原因，预计荧光定量PCR 检测技术在今后5 到10 年内可保持前锋。

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随着对动物检疫工作的发展与完善,仅依靠兽医的经验检查已经不能满足现今动物疫病诊断的需求,因此,病理化验室开始发挥重要作用.如蓝耳病的病原学检测方式需要采集病猪的扁桃体,淋巴结,肺,肝,脾等,利用10%的中性福尔马林进行固定,经过石蜡切片,HE染色之后使用光镜对样本进行病理学组织检查得出结论,又如猪瘟的病理学检查方式主要有免疫荧光实验,酶联免疫吸附实验,核酸探针技术,基因芯片检测技术等.

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动物疫病包括动物传染病、寄生虫病。动物传染病，即由病原体侵入动物体内，使动物产生具有一定潜伏期和临床症状并具有传播性 的动物疫病，如口蹄疫、鸡瘟、牛肺疫、炭疽、布鲁氏菌病、狂 犬病等。动物寄生虫病，即由寄生虫寄生在动物体内或体表引起 的疾病，如猪囊虫病、旋毛虫病、钩端螺旋体病、血吸虫病、疥瞒等。根据动物疫病对养殖业生产和人体健康的危害程度，我国还 将动物疫病分为下列三类：对人畜危害严重、需要采取紧急、严 厉的强制预防、控制、扑灭措施的为一类疫病；可造成重大经济 损失、需要采取严格控制、扑灭措施，防止疫情扩散的为二类疫 病；常见多发、可能造成重大经济损失、需要控制和净化的为三 类疫病。

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动物防疫动物疫病的预防、控制、扑灭及动物和动物产品的检疫。狭义的动物防疫，是为了预防某种动物疫病，对所饲养的动物进行针对性地接种疫苗后，产生一种明显针对该种疫病的免疫力，也就是通过打预防针而预防动物疫病的发生。疫病预防指采取一切手段将某种传染病排除在一个未受感染动物群之外的防疫措施。通过多种隔离设施和检疫措施阻止某种传染病进入一个尚未被污染的地区；或通过免疫接种、药物预防和环境控制等措施，保护动物免遭疫病危害。

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在PCR反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生进入指数期、线性期和终的平台期，因此可以在PCR反应处于指数期的某一点 上来检测PCR产物的量，并且由此来推断模板初的含量。为了便于对所检测样本进行比较，在real-time Q-PCR反应的指数期，首先需设定一定荧光信号的域值，一般这个域值（threshold）是以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号 （baseline），荧光域值的缺省设置是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。如果检测到荧光信号超过域值被认为是真 正的信号，它可用于定义 样本的域值循环数（Ct）。Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的 对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，因此只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样 品的起始拷贝数。