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阜阳市实时荧光定量PCR仪研发

发布时间:2024-04-20 01:15:35
阜阳市实时荧光定量PCR仪研发

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动物防疫动物疫病的预防、控制、扑灭及动物和动物产品的检疫。狭义的动物防疫,是为了预防某种动物疫病,对所饲养的动物进行针对性地接种疫苗后,产生一种明显针对该种疫病的免疫力,也就是通过打预防针而预防动物疫病的发生。疫病预防指采取一切手段将某种传染病排除在一个未受感染动物群之外的防疫措施。通过多种隔离设施和检疫措施阻止某种传染病进入一个尚未被污染的地区;或通过免疫接种、药物预防和环境控制等措施,保护动物免遭疫病危害。

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选择灵敏度高的热启动Taq酶。一般说,Taq酶的扩增效率高,灵敏度就高,但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低,建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释,在较低的几个稀释度进行PCR检测,选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。目前国内市场上常用的ABI、Bioline、Biog的扩增灵敏度都比较高,但知名品牌T的灵敏度略低,研究者可根据自身的实验要求进行选择。

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热启动PCR(hot start PCR)是指使Taq DNA 聚合酶只有在样品温度至少超过70℃时才发挥作用的PCR,可提高反应的特异性。Taq DNA 聚合酶通常在比适宜温度低得多的条件下仍有较强的活性。PCR 反应的初加热过程中,样品温度上升到70℃之前,在较低的温度下引物可能与部分单链模板形成非特异性结合,并在Taq DNA 聚合酶的作用下延伸。结果会导致非靶序列的扩增,影响反应的特异性。热启动可减少非靶序列的扩增,提高反应的特异性。在引物设计时如果某位点因为遗传元件的定位而受限,如site-directed 突变、表达克隆或用于DNA 工程的遗传元件的构建和操作等情况,热启动PCR 尤为有效。

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热启动酶是耐高温的依赖于DNA模板的DNA聚合酶,来源于嗜热的嗜热水生菌Thermus aquaticus YT一1,一般应用于PCR反应。TaqDNA聚合酶是一种M92+依赖酶,反应体系中须有Mg2+存在,然而保持适当的Mg2+浓度十分重要,因为Mg2+浓度过高或过低均会影响引物与模板的结合、模板与PCR产物的解链温度、引物二聚体的形成以及酶的活性与精 确性。

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常用的动物检疫方法:常用的动物检疫方法有临床检查、实验室检验等方法。临床检查方法主要看动物的表现(静、动、卧、起、立、精神、食欲等)是否正常,体温、脉搏、呼吸等是否在正常生理指标范围内。实验室检验则依照农业部颁布的动物检疫操作规程规定的检疫方法和判定标准执行。①产地检疫。是指动物离开饲养产地之前的检疫。②屠宰检疫。是指在宰前、宰后及屠宰过程中,对动物及动物产品所实施的检疫。包括宰前检疫②屠宰检疫。是指在宰前、宰后及屠宰过程中,对动物及动物产品所实施的检疫。包括宰前检疫和宰后检疫两个环节。③检疫证明。是指检疫机关给检疫合格的动物、动物产品出具的法律书证。现行农业部统一监制、发放和使用的检疫证明包括《动物检疫合格证明》、《动物产品检疫合格证明》、《出县境动物检疫合格证明》、《出县境动物产品检疫合格证明》和《动物及动物产品运载工具消毒证明》5种。