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保定市实时荧光定量PCR仪服务

发布时间:2024-05-04 01:14:23
保定市实时荧光定量PCR仪服务

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分子诊断是当代医学发展的重要前沿领域之一,其核心技术是基因诊断,常规技术包括:(1)聚合酶链式反应(PCR);(2)DNA测序(DNA sequencing);(3)荧光原位杂交技术(FISH);(4)DNA印迹技术( DNA blotting );(5)单核苷酸多态性(SNP);(6)连接酶链反应(LCR);(7)基因芯片技术(gene chip)。

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Taq DNA聚合酶具有很高的加工合成特性,在适反应温度时,dNTP的掺入速度为35~100 nt/(s.酶分子),扩增长度可达7.6 kb。在低温条件下,Taq DNA聚合酶的活性明显降低,导致此酶在模板内局部二级结构区域的延伸能力受阻或前进速率常数与解离常数的比值发生改变。在较高的温度(95℃以上)时,很少有DNA合成;在体外,DNA在较高温度时的合成速度受到引物或引物链与模板链双链结构稳定性的限制。由于Taq DNA聚合酶的适反应温度高达75~80℃,故退火温度和延伸温度均可适当提高,这限制了非特异性扩增产物的出现,增加了PCR反应的特异性。

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分子诊断主要是应用分子生物学方法检测生物体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术。由于分子诊断可以从基因层次进行检测,因此检测灵敏度和准确性的优势较为明显,可在感染初期识别病毒或者提早确认基因缺陷,从而提供个性化的医疗诊断服务,主要应用于遗传病、传染性疾病、肿瘤等疾病的检测与诊断。分子诊断主要包括 核酸诊断 和 生物芯片技术 。

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PCR产品占据分子诊断的主要市场,基因芯片是分子诊断市场发展的主要趋势。PCR产品灵敏度高、特异性强、诊断窗口期短,可进行定性、定量检测,可广泛用于肝炎、性病、肺感染性疾病、优生优育、遗传病基因、肿瘤等,填补了早期免疫检测窗口期的检测空白,为早期诊断、早期治疗、安 全用血提供了有效的帮助。基因芯片是分子生物学、微电子、计算机等多学科结合的结晶,综合了多种现代高精尖技术,被专家誉为诊断行业产品。但其成本高、开发难度大,产品种类很少,只用于科研和药物筛选等用途。

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传染病流行过程的三:个基本环节:①传染源。即传染来源,就是被感染的动物,包括传染病病畜禽和带菌(毒)动物,如潜伏期带菌(毒)、病愈后带菌(毒)及健康动物带菌(毒)等。②传播方式和途径。有直接接触传播及间接接触传播。③易感动物。就是对某种传染病的病原体有易感性的动物。

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Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强,PCR扩增的指数增长期越长,‘S型’曲线更加典型,荧光信号值更高,而且更适合做多重PCR检测。我们曾比较过多家公司的热启动Taq酶,在国外品牌中,英国Bioline公司的热启动Taq酶,酶动力较好,可做4重PCR,等量起始模板CT30时的荧光信号值高。在国内品牌中,BIOG热启动Taq酶的指数期较长,可做3重PCR,且扩增曲线的‘S’型不受影响,其它的国产品牌一般只能支持2重反应,在做3重反应时,扩增曲线低矮,荧光信号值较低,无典型扩增曲线,结果很难判定。