莆田市实时荧光定量PCR仪研发

常规普通PCR常见问题：1. 优化反应条件，梯度摸索退火温度，延长退火延伸时间，增加反应循环数（30-45区间为宜）。2. 对核酸模板进行纯化，或使用商业化核酸提取试剂盒进行提取，增加核酸模板的上样量。3. 优化反应体系（预混体系除外），改变检测体系中的Mg2+浓度及dNTPs用量，更换体系中Buffer。4. 重新设计引物，避免引物二聚体和链内二级结构，在一次稀释引物后可分装成多支小管，减少反复冻融次数。

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动物疫病诊断的主要内容有:一是对血、 尿、粪等进行临床常规化验;二是从流行病学角度，调查研究动物疫病流行情况，主要调查动物发病时间及地点、疫病蔓延情况、疫情来源及传播的途径与方式等;三是从病理学方面，剖检因忠传染病而死亡的畜禽尸体，查看其病理变化，或者取病料进行送检，再进一步做病理组织学方面的诊断;四是从微生物学角度，检查、坚定从患病的畜禽病料当中分离并且培养出来的病原微生物，或者是进行动物接种试验等，五是从免疫学角度，对组织或者细胞的变态反应、细胞的免疫功能及血清学反应等进行诊断。

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加强技术指导。中国动物疫病预防控制中 心要制定国家动物疫病强制免疫技术指南，组织开展省级免疫技术师资培训。国家兽医参考实验室、专业实验室、区域实验室和各省份动物疫病预防控制中 心要持续跟踪病原变化和流行趋势，为各地免疫方案的制定、疫苗的选择和更新提供技术支撑。各省份要组织做好乡镇动物防疫机构、村级防疫员及社会化服务组织的免疫技术培训。疫苗及诊断试剂供应企业要做好培训、技术服务等工作。

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分子诊断仪器主要包括核酸提取仪、PCR 扩增仪、核酸分子杂交仪、基因芯片仪和基因测序仪等。在技术相对容易攻破的中端仪器领域，如核酸提取仪、PCR 扩增仪、核酸分子杂交仪、基因芯片仪国产化已经成型，国产产品占据了主要市场，而 基因测序仪的国产化进程正在发起突围，主要表现为三种方式： （1）并购国外的测序仪公司，在其核心技术的基础上推出自主品牌的测序仪，以华大基因为代表。（2）利用内生科研能力自主研发，以华因康基因、紫鑫药业等公司为代表。（3）与国外知名测序仪生产企业合作，在其测序仪原型的基础上加以改造，形成具有特殊用途的自主品牌的测序仪，代表公司是贝瑞和康、达安基因和博奥生物等。